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ELISA試劑盒標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素
更新時(shí)間:2017-07-11   點(diǎn)擊次數(shù):784次

ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠標(biāo)本及采集、貯運(yùn)因素:
(1)ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠嚴(yán)重溶血,以HRP 為標(biāo)記的ELISA 測(cè)定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色造成假陽性; 
(2)混有紅細(xì)胞的血清 易沉淀或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈;
(3)如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng); 
(4)標(biāo)本凝固不全,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA 測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果; 
(5)采血試管洗滌不*、ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠反復(fù)使用易交叉污染; 
(6)塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。 
ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)ELISA試劑盒進(jìn)口大鼠定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

 

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