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elisa試劑盒白介素類實驗操作程序總結(jié)
更新時間:2017-08-22   點擊次數(shù):735次

實驗開始前,各elisa試劑盒白介素類均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合elisa試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。的實驗操作elisa試劑盒白介素類程序總結(jié)
1.準備試劑,樣品和標準品
2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應(yīng)30分鐘
3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應(yīng)30分鐘
4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應(yīng)10分鐘
5.加入終止液
6.15分鐘之內(nèi)度OD值
7.計算
YSRIBIO226    Sodium Ascorbate     抗壞血酸鈉標準品    134-03-2     200mg    
YSRIBIO227    Sodium Acetate (AS)    乙酸鈉標準品    127-09-3     1g    
YSRIBIO228    Simvastatin     辛伐他汀標準品    79902-63-9     200mg    
YSRIBIO229    Simethicone     二甲基硅油標準品    8050-81-5     50g    
YSRIBIO230    Silydianin     水飛薊寧標準品    29782-68-1     20mg    
YSRIBIO231    Silybin     水飛薊素標準品    22888-70-6     50mg    
YSRIBIO232    Silver Sulfadiazine     磺胺嘧啶銀標準品    22199-08-2     200mg  
elisa試劑盒白介素類  

 

 

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