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ELISA試劑盒SCI文章過碘酸鹽氧化法
更新時間:2018-01-05   點擊次數(shù):1043次

  ELISA試劑盒SCI文章只適用于含糖量較高的酶。辣根過氧化物酶的標(biāo)記常用此法。反應(yīng)時,過碘酸鈉將HRP分子表面的多糖氧化為醛基很活潑,可與蛋白質(zhì)上的氨基形成Schiff氏堿而結(jié)合。酶標(biāo)記物按克分子比例聯(lián)結(jié),其*比例為:酶:抗體=1~2:1。此法簡便有效,一般認(rèn)為是HRPzui可取的標(biāo)記方法,但也有人認(rèn)為所有試劑較為強烈,各批實驗結(jié)果不易重演。    
  按以上方法制備的酶結(jié)合物一般都混有未結(jié)合物的酶和抗體。理論上,結(jié)合物中混有的游離酶一般不影響ELISA試劑盒中zui后的酶活性測定,因經(jīng)過*洗滌,游離酶可被除去,并不影響zui終的顯色。但游離的抗體則不同,它會與酶標(biāo)抗體競爭相應(yīng)的固相抗原,從而減少了結(jié)合到固相上的酶標(biāo)抗體的量。因此制備的酶結(jié)合物應(yīng)予純化,去除游離的酶和抗體后用于檢測,效果更好。    
 結(jié)合物制得后,在用作ELISA試劑盒SCI文章前尚需確定其適當(dāng)?shù)墓ぷ鳚舛?。使用過濃的結(jié)合物,既不經(jīng)濟,又可使本底增高;結(jié)合物的濃度過低,則又影響檢測的敏感性。所以必須對結(jié)合物的濃度予以選擇。zui適的工作濃度就是指結(jié)合物稀釋至一定濃度時,能維護(hù)一個低的本底,并獲得測定的*靈敏度,達(dá)到zui合適的測定條件和測定費用的節(jié)省。就酶標(biāo)抗體本身而言,它的有效工作濃度是指與其相應(yīng)抗原包被的載體作試驗時,能得到陽性反應(yīng)的稀釋度。
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