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濾紙酶可見分光光度法檢測試劑盒酶液提取
更新時間:2022-05-17   點擊次數(shù):789次

濾紙酶可見分光光度法檢測試劑盒酶液提?。?/p>


1. 組織:按照質量(g):蒸餾水體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g,加入1mL蒸餾水)加入蒸餾水,冰浴勻漿后于4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測。


2. 細胞:按照細胞數(shù)量(104個):蒸餾水體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后4℃,12000rpm離心10min,取上清置于冰上待測。


3. 培養(yǎng)液或其它液體:直接檢測。


自備實驗用品及儀器


天平、研缽、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。


試劑組成和配制


試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。


試劑二:液體40mL×1瓶,4℃保存。


濾紙條:50mg×50條。

測定原理

濾紙酶水解濾紙產生的還原糖能與3,5-二**水楊酸生成紅棕色氨基化合物,在540nm處有最大光吸收,在一定范圍內反應液顏色深淺與還原糖的量成正比,可測定計算得濾紙酶的活力。

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