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小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明
更新時(shí)間:2022-10-20   點(diǎn)擊次數(shù):949次

小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞提取物實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明 :

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

凍保存細(xì)胞之方法:

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

注意事項(xiàng):本品應(yīng)在低溫下保存,長(zhǎng)時(shí)間在暴露在空氣中,含量會(huì)有所降低。

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