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分析ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定報(bào)告單對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的影響
更新時(shí)間:2014-07-16   點(diǎn)擊次數(shù):727次

分析ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)測(cè)定報(bào)告單對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的影響

    ELISA試劑盒測(cè)定中單個(gè)空缺孔的非特異吸收上有一定程度的不確定性,也就是說每次測(cè)定或同次測(cè)定空缺孔位置的不同均有可能得到不同吸光度測(cè)定值,所以在ELISA測(cè)定比色時(shí),是使用雙波長(zhǎng)比色。ELISA試劑盒因此,雙波長(zhǎng)比色測(cè)定具有能排除由微滴板本身、板孔內(nèi)標(biāo)本的非特異吸收、指紋、刮痕、灰塵等對(duì)特異顯色測(cè)定吸光度的影響的長(zhǎng)處。ELISA試劑盒比色結(jié)果的表達(dá)以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按劃定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。
    zui后酶標(biāo)儀給出的數(shù)值為敏感波長(zhǎng)下的吸光度值與非常感波長(zhǎng)下的吸光度值的差。以軟板為載體的試驗(yàn),需先將板置于尺度96孔的座架中,才可進(jìn)行比色。ELISA試劑盒比色時(shí)應(yīng)先以蒸餾水校零點(diǎn),測(cè)讀底物孔。
   所謂的單波長(zhǎng)比色等于通常的以對(duì)顯色具有zui大吸收的波長(zhǎng)如450nm或492nm進(jìn)行比色測(cè)定;而雙波長(zhǎng)雙色則酶標(biāo)儀在敏感波長(zhǎng)如450nm和非敏感波長(zhǎng)630nm下各測(cè)定一次,敏感波上下的吸光度測(cè)定值為樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度與板孔上指紋、刮痕、灰塵等臟物所致的吸光度之和;非敏感波長(zhǎng)下測(cè)定即改變波長(zhǎng)至一定值,ELISA試劑盒使得樣本測(cè)定酶反應(yīng)特異顯色的吸光度值為零,此時(shí)測(cè)得的吸光度即為臟物的吸光度值。

    在沒有細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)的情況下,當(dāng)新骨髓祖細(xì)胞的流入在小鼠體內(nèi)被阻斷時(shí),老細(xì)胞就會(huì)重新獲得自我更新并zui終被改變的能力,導(dǎo)致“T-細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞性白血病”(T-ALL)的發(fā)生,ELISA試劑盒與人類的這種白血病相似。

    與此同時(shí),基因表達(dá)會(huì)發(fā)生變化,也會(huì)出現(xiàn)經(jīng)常在人類T-ALL中所見到的基因突變。因此,細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)會(huì)充當(dāng)一個(gè)“腫瘤抑制因子”機(jī)制。ELISA試劑盒這項(xiàng)研究也許還能幫助解釋用基因矯正過的自體祖細(xì)胞治療之后在“與X相關(guān)的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷”患者身上所看到的、被廣泛討論過的T-細(xì)胞白血病。

 

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