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幾種常用的低溫包埋劑
更新時(shí)間:2015-07-20   點(diǎn)擊次數(shù):1013次


    Lowicryls:Lowicryls是丙烯酸鹽(acrylate)和甲基丙烯酸鹽(methacrytate)化學(xué)物質(zhì),包括K4M、K11M、KM23等。其主要特點(diǎn)是在低溫下(K4M:一35℃;K1tM和KM23:-60~-80℃)仍保持低黏度,并具有在紫外光(波長(zhǎng)360nm)照射下聚合的能力。這種光聚合作用與溫度無(wú)關(guān),但實(shí)驗(yàn)中為保持包埋劑的低黏稠度,以利于其向組織細(xì)胞內(nèi)滲透,要求在低溫下照射。在這些包埋劑中,K4M和K11M具有親水性,能較好地保持組織細(xì)胞的微細(xì)結(jié)構(gòu)和抗原性,特別適于免疫細(xì)胞化學(xué)染色,且背景染色低,是超微結(jié)構(gòu)定位組織細(xì)胞抗原的良好包埋劑。KM23為疏水性,圖像反差好,較適于掃描電鏡和透射電鏡的暗視野觀察標(biāo)本制作。

    包埋劑的配制:商品Lowicryls包埋劑由三部分組成,即單體(monomer)、交聯(lián)劑(crosslinker)和引發(fā)劑(initiator)。調(diào)整單體和交聯(lián)劑的比例,可制備軟硬度合適的包埋塊(包埋時(shí)多用硅膠囊代替橡膠或塑料制品,后兩者影響紫外線的吸收)。配制比例
    K4M      8.65g    l7.30g    25.95g    34.6g
    交聯(lián)劑    1.35g    2.70g     4.05g     5.4g
    引發(fā)劑    0.05g    0.10g     0.15g     0.20g
    合計(jì)      10.05g   20.10g    30.15g    40.20g

    一般可分別用注射器取包埋劑,置于玻璃燒杯內(nèi),天平稱量,將三者按順序加入后用玻璃棒輕輕攪動(dòng)3~5分鐘。切忌過(guò)分用力攪拌,以防產(chǎn)生氣泡,影響包埋效果。細(xì)胞

 

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