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陰性染色產(chǎn)生的原因
更新時(shí)間:2015-07-31   點(diǎn)擊次數(shù):1411次

我先用石蠟切片做了5次,結(jié)果一直不理想(表現(xiàn)為未見(jiàn)特異性強(qiáng)染色);近幾日,我又切了冰凍切片,做了2次,終于基本成功了。在這個(gè)過(guò)程中,我對(duì)免疫熒光染色技術(shù)有了全新的認(rèn)識(shí),而前些天發(fā)出免疫熒光求助貼,回復(fù)的很少,所以有必要加強(qiáng)對(duì)免疫熒光方面的討論),不妥之處敬請(qǐng)指正。有人會(huì)問(wèn)酶免疫組化做的好好的,為何要做免疫熒光?其實(shí),這也是我以前思考的難題,現(xiàn)在我認(rèn)為可能胞膜蛋白含量不高,用普通免疫免疫組化可能做不出來(lái),需要敏感的免疫熒光方法來(lái)進(jìn)行蛋白檢測(cè)(我是看許多外文文獻(xiàn)都是這樣做的,因此選擇免疫熒光染色。)抗體

陰性染色產(chǎn)生的原因有:
(1)一抗和二抗?jié)舛炔缓线m或孵育條件不妥。

(2)熒光素提前衰退。熒光素質(zhì)量不佳或操作過(guò)程中沒(méi)有注意避光等防止熒光素衰退的事項(xiàng)。

(3)血清封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

(4)抗體稀釋液PH值不合適,影響抗原抗體反應(yīng)。

(5)組織切片不平、裂片或脫片很?chē)?yán)重,易引起大塊陰性著色。

(6)組織標(biāo)本不新鮮或已經(jīng)冷凍組織制成的切片中抗原易彌散,易引起本來(lái)表達(dá)的部位陰性染色或弱著色。

(7)熒光顯微鏡不會(huì)使用,激發(fā)波長(zhǎng)選擇錯(cuò)誤。

Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit   小鼠溶菌酶  規(guī)格:  48T/96T
Mouse lymphocyte factor ELISA Kit  小鼠淋巴細(xì)胞因子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA Kit  小鼠乳酸脫氫酶  規(guī)格:  48T/96T
Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit  小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit   小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgM ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgM  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgG ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgG  規(guī)格:  48T/96T
mouse IgA ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgA  規(guī)格:  48T/96T
Mouse eosinophil cationic protein,ECP ELISA Kit   小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白  規(guī)格:  48T/96T
Mouse D-Lactate Dehydrogenase,D-LDH ELISA Kit   小鼠D-乳酸脫氫酶  規(guī)格:  48T/96T
抗體Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit  小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 3,CD3 ELISA Kit  小鼠CD3分子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse Cluster of differentiation 19,CD19 ELISA Kit  小鼠CD19分子  規(guī)格:  48T/96T
Mouse c-jun ELISA Kit   小鼠c-jun  規(guī)格:  48T/96T

 

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