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正確的使用ELISA試劑盒的步驟
更新時間:2015-12-16   點擊次數(shù):823次

    很多人在做檢測的時候,都不太在意ELISA試劑盒中的說明書上的檢測步驟,覺得自己都知道,都懂的。但就是因為這種心態(tài),所以造成有時候的檢測結(jié)果出現(xiàn)失誤。生物檢測本來就是個很嚴肅并且嚴謹?shù)氖虑?,你的一個小的疏忽可能就會造成意想不到的錯誤。

正確的使用ELISA試劑盒的步驟:

1.在使用之前要將試劑充分的混合均勻,但是要注意在搖晃的時候不要產(chǎn)生過多的泡沫,從而造成有太多的空氣進入試劑中,產(chǎn)生測試誤差。

2.根據(jù)要檢測樣品的數(shù)量來確定的板條數(shù)。每個比對的樣品和空白孔是做復(fù)孔,而樣品的數(shù)量就可以自己視情況而定,不過能用復(fù)孔的還是用復(fù)孔。將標本液體1:1稀釋后倒入50微升的反應(yīng)孔中。ELISA試劑盒

3.在反應(yīng)孔中在加入50微升的待測樣品,然后馬上加入50微升的生物素標記抗體,蓋上模板,輕輕搖晃使其混合均勻后,在37攝氏度的恒溫下等待1小時。

4.將孔內(nèi)液體甩去,加滿洗滌液,震蕩約30秒后,在甩去洗滌的液體,用紙將水吸干。這樣子重復(fù)三次。再在沒空加入80微升的親和鏈酶素-HRP,同上混合均勻后,在37攝氏度的恒溫環(huán)境下等待半小時。

5.同步驟四的洗滌方法。洗滌干凈后,在沒空中加入底物A,B各50微升,小心混合均勻,避免光照在37攝氏度下等待10分鐘。ELISA試劑盒

6.取出酶標板,迅速加入終止液50微升,測定結(jié)果。在450納米的波長處檢測各個孔的OD值。

 

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