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蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒

簡(jiǎn)要描述:

蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫(kù)"器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對(duì)于植物蔗糖合成具有重要意義。

更新時(shí)間:2024-09-02;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:976

蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒

商品詳情:
測(cè)定意義

蔗糖是源(葉片等)光合產(chǎn)物向“庫(kù)"器官運(yùn)輸?shù)闹饕螒B(tài)。蔗糖合成酶(Sucrose Synthase, EC 2.4.1.13)是雙向反應(yīng)酶,既可催化蔗糖合成又可催化蔗糖分解,是蔗糖代謝的關(guān)鍵酶之一。研究其合成方向SS-Ⅱ的活性對(duì)于植物蔗糖合成具有重要意義。

貨號(hào)

規(guī)格

檢測(cè)方法

YSH3521

100管/48樣

微量法

YSH3521-1

50管/24樣

可見分光光度法

測(cè)定原理

SS-Ⅱ催化游離果糖與葡萄糖供體UDPG反應(yīng)生成蔗糖,蔗糖與反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化,在480nm下有特征吸收峰,酶活力大小與顏色的深淺成正比。

需自備的儀器和用品

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰
樣品中AA提?。?/span>

1.按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行室溫勻漿,然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,蓋緊后(防止水分散失)置于沸水浴提取15 min;自來水冷卻后,8000g,,4℃離心10min,上清液置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接檢測(cè)。

計(jì)算公式如下:

1、血清(漿)LAP活力的計(jì)算:

單位的定義:每mL血清(漿)每分鐘生成1 nmol的對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min/mL)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷V樣÷T=205.8×ΔA

2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中LAP活力的計(jì)算:

1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=205.8×ΔA÷W

3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol 對(duì)硝基苯胺定義為一個(gè)酶活力單位。

LAP(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(2000×V樣÷V樣總) ÷T=0.103×ΔA

V反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4 L;ε:對(duì)硝基苯胺摩爾消光系數(shù),9.72×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.05 mL;V樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,2 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;2000:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),2000萬。

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蔗糖合成酶(合成方向 SSⅡ)測(cè)試盒氨基肽酶(LAP)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

磷丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷丙糖異構(gòu)酶(TPI)測(cè)試盒/微量法100T/96S

磷果糖激酶(PFK)測(cè)試盒/紫外比色法50T/48樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/微量法100管/96樣

磷烯醇式丙酮羧化酶(PEPC)測(cè)試盒/紫外比色法50T/48樣

磷烯醇式丙酮羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒/分光光度法50管/48樣

磷烯醇式丙酮羧激酶(PEPCK)測(cè)試盒/微量法100管/96樣
注意事項(xiàng):

1. 試劑盒中試劑三、試劑四和標(biāo)準(zhǔn)品均需臨用前配制,且避光保存,配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢。

2. 為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,需先取1-2個(gè)樣做預(yù)實(shí)驗(yàn),如果測(cè)定的吸光值過高(高于2.5),用蒸餾水稀釋后再測(cè)定。

3. 與茚三酮反應(yīng)在570nm處無吸收峰,因此,570nm處測(cè)定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量。

4.檢出限為100μmol/L。

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